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自動(dòng)核酸提取儀在法醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用
更新時(shí)間:2022-04-06瀏覽:1012次
自動(dòng)核酸提取儀是應(yīng)用配套的核酸提取試劑來(lái)自動(dòng)完成樣本核酸提取工作的儀器,廣泛應(yīng)用在疾病控制點(diǎn)、臨床疾病診斷、法醫(yī)學(xué)鑒定、環(huán)境微生物檢測(cè)、食品檢測(cè)、畜牧業(yè)和分子生物學(xué)研究等多種領(lǐng)域。
采用磁保護(hù)套(攪拌套)來(lái)轉(zhuǎn)移磁珠、混勻液體,深孔板底部采用加熱模塊加熱深孔板孔內(nèi)的液體,從而模擬手工操作的流程。磁棒式核酸提取儀通常采用卡片或彈簧鋼珠固定96孔深孔板,底部有凹槽形的加熱條,在進(jìn)行有加熱條件的實(shí)驗(yàn)時(shí),如果深孔板的孔位與底部加熱凹槽貼合的不緊密,會(huì)直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,這種情況導(dǎo)致孔位間的實(shí)驗(yàn)結(jié)果不穩(wěn)定是隨機(jī)出現(xiàn)的。
如果發(fā)現(xiàn)某一固定孔位的提取結(jié)果總是與其他孔位相差比較大,可以考慮儀器加熱模塊是否有問(wèn)題,同時(shí)觀察該孔位的上游裂解孔位內(nèi)是否有磁珠殘留,可用空白樣本檢測(cè)儀器在孔位間的轉(zhuǎn)移磁珠能力是否干凈。
自動(dòng)核酸提取儀不僅可以用于實(shí)驗(yàn)室的各種研究,也可以用于其他各個(gè)合適的領(lǐng)域,就拿法醫(yī)學(xué)來(lái)說(shuō),核酸提取儀可以提高檢材的檢驗(yàn)效率和成功率。全自動(dòng)核酸提取儀具有不錯(cuò)的DNA提取效率,真空濃縮儀可在一定程度上濃縮DNA,兩者可以聯(lián)合使用。
應(yīng)用全自動(dòng)核酸提取儀對(duì)上述樣本進(jìn)行DNA純化提取,提取后的DNA洗脫液取6μL直接進(jìn)行擴(kuò)增,剩余部分使用真空濃縮儀進(jìn)行濃縮,濃縮前后的DNA均使用試劑盒進(jìn)行擴(kuò)增、檢測(cè)。結(jié)果添加果酸的梯度樣本僅在40倍稀釋時(shí)獲得完整STR分型結(jié)果,另外5種方式處理的梯度樣本在40~160倍稀釋時(shí)均獲得完整的STR分型。DNA濃縮后的STR分型結(jié)果顯示,平均峰高和基因座檢出率均有一定程度的提高,但是效果并不明顯。